Ngày nhận bài: 06-06-2025
Ngày xuất bản: 13-06-2025
Lượt xem
Download
Cách trích dẫn:
BIỂU HIỆN GEN MÃ HÓA IL-2 CỦA NGƯỜI VỚI CHAPERONE GROESL VÀ THIOREDOXIN TRONG TẾ BÀO Escherichia coli BL21 (DE3)
Từ khóa
Biểu hiện, chaperone, interleukin-2, thioredoxin, tín hiệu tiết pelB
Tóm tắt
Interleukin-2 (IL-2) là một trong các cytokine đóng vai trò quan trọng trong hệ miễn dịch. IL-2 thúc đẩy sự hoạt hóa của các tế bào T, vì vậy thường được sử dụng trong điều trị ung thư bằng các liệu pháp miễn dịch như ung thư biểu mô thận ác tính và ung thư hắc tố. Gen mã hóa il-2 cải biến thay thế Cys125 bằng Ser đã được đưa vào vector biểu hiện pET22b(+) có gắn trình tự tiết pelB (pelB signal sequence) để biểu hiện trong E. coli BL21 (DE3). Để tăng hiệu quả biểu hiện protein đúng cấu trúc và tính tan của protein, IL-2 được biểu hiện cùng với chaperone GroESL và thioredoxin (Trx). Kết quả cho thấy các protein IL-2 biểu hiện cùng GroESL và Trx có kích thước khoảng 20 kDa vẫn tồn tại ở dạng không tan trong tế bào chất và gắn với tín hiệu tiết pelB.
Tài liệu tham khảo
Hyung JC, H.S., Hye J.L., Hye S.C., Nimish N.D., Minh Q.P., William E.B. (2005). Comparative production of human interleukin-2 fused with green fluorescent protein in several recombinant expression systems. Biochem Engin J., 24: 225-233.
Liang, S.M., et al. (1985). Characterization of human interleukin 2 derived from Escherichia coli. Biochem J, 229(2): 429-439.
Marcker, K. and Sanger F. (1964). N-Formyl-Methionyl-S-Rna. J Mol Biol, 8: 835-840.
Fernandez-San Millan, A., et al. (2007). Expression of recombinant proteins lacking methionine as N-terminal amino acid in plastids: human serum albumin as a case study. J Biotechnol, 127(4): 593-604.
Bazewicz, C.G., et al. (2012). Expanding the utility of 4-cyano-L-phenylalanine as a vibrational reporter of protein environments. J Phys Chem B, 116(35): 10824-10831.
Martinez-Alonso, M., et al. (2010). Side effects of chaperone gene co-expression in recombinant protein production. Microb Cell Fact, 9: 64.
Halfmann, G., et al. (1993). Targeting of interleukin-2 to the periplasm of Escherichia coli. J Gen Microbiol, 139(10): 2465-2473.