Ngày nhận bài: 27-07-2014 / Ngày duyệt đăng: 24-09-2014 / Ngày xuất bản: 06-08-2025
Nội dung bài này đề cập một số kết quả nghiên cứu về biến nạp di truyền tạo cây mang gen HBsAg mã hóa protein vỏ virus viêm gan B trên một số giống cà chua bi như TN 412 và TN 84 phục vụ định hướng dài hạn tạo vacxin từ thực vật. Kết quả nghiên cứu tái sinh chồi từ lá mầm hai giống góp phần tạo tiền đề cho nghiên cứu biến nạp gen. Lá mầm hai giống (7 ngày tuổi) được gây nhiễm và nuôi chung với vi khuẩn Agrobacterium tumefaciens mang gen HBsAg (promoter PDS + T7), gen nptII kháng kanamycin và gen gusA. Sau 2 ngày nuôi chung mô với vi khuẩn, lá mầm được rửa sạch vi khuẩn và nuôi cấy chọn lọc trên môi trường MS có bổ sung 0,5 mg/l IAA, 2 mg/l BA, 500 mg/l cefotaxime và 30 - 50 mg/l kanamycin. Qua ít nhất bốn lần cấy chuyển (15 - 20 ngày/lần) trên môi trường chọn lọc, nhiều dòng cây chuyển gen ở cả hai giống đã được thu nhận; các dòng cây chuyển gen đã được kiểm tra sự hiện diện và biểu hiện của các gen chuyển bằng kỹ thuật PCR, kỹ thuật hóa mô tế bào GUS, kỹ thuật PCR, Southern blot và Western blot. Một số cá thể T1 của một dòng cây chuyển gen T0 đã được kiểm tra sự hiện diện và biểu hiện của gen nptII bằng thử nghiệm định tính in vitro khả năng kháng kanamycin và bằng kỹ thuật PCR; tương tự, gen HBsAg ở cá thể T1 cũng đã được kiểm tra bằng kỹ thuật PCR.
