Date Received: 14-08-2017
Date Accepted: 18-09-2017
Date Published: 06-08-2025
##submissions.doi##: https://doi.org/10.31817/tckhnnvn.2017.15.9.
Views
Downloads
How to Cite:
Phân lập, tuyển chọn và định danh Aspergillus oryzae có khả năng sinh protease trung tính và chịu mặn cao từ một số thực phẩm lên men truyền thống
,
Nguyen Hoang Anh
Keywords
Aspergillus oryzae, hoạt độ protease, chịu mặn
Abstract
Nghiên cứu này nhằm phân lập, tuyển chọn và định tên Aspergillus oryzae từ một số thực phẩm lên men truyền thống có khả năng sinh protease trung tính và chịu mặn cao, có tiềm năng ứng dụng trong lên men thực phẩm và các ứng dụng khác ở điều kiện muối cao. Mười hai trong 23 chủng được định danh sơ bộ là Aspergillus oryzae bằng phương pháp quan sát hình thái. Trong đó, chủng TB1 phân lập từ tương bần sinh protease cao nhất với 49,26 U/l, tương ứng với đường kính 17mm của vòng phân giải trên đĩa thạch chứa BCG được định danh bằng phương pháp sinh học phân tử và đặt tên là Aspergillus oryzae TB1. Protease của chủng này có hoạt độ cao trong khoảng pH 5,0 - 8,0 và tối ưu ở pH 7,0. Hoạt độ enzyme vẫn còn 70% sau 8 giờ ủ ở pH 7,0 và 37oC. Nhìn chung, hoạt độ protease giảm khi nồng độ muối natri clorua tăng từ 0 đến 16%, hoạt độ tương đối là 51,8% ở 16% NaCl và nồng độ muối này được sử dụng để xác định khả năng chịu mặn của protease. Kết quả cho thấy hoạt độ enzyme còn lại là 49,2% sau 9 giờ ủ ở 37oC.
References
Carrie Cupp-Enyard (2008). Sigma's Non-specific Protease Activity Assay - Casein as a Substrate. Journal of Visualized Experiments.
Chutmanop, J., Chuichulcherm, S., Chisti, Y., Srinophakun, P. (2008). Protease production by Aspergillus oryzae in solid state fermentation using agroindustrial substrates. Journal of Chemical Technology and Biotechnology, 83(7): 1012-1018.
De Castro, RJS., Sato, HH. (2014). Protease from Aspergillus oryzae: biochemical characterization and application as a potential biocatalyst for production of protein hydrolysates with antioxidant activities. Journal of Food Processing.
Doyle, J.J., Doyle, J.L. (1987). A rapid DNA isolation procedure for small quantities of fresh leaf tissue. Phytochem bull., 19: 11-15.
Fernandes, L., Zimmermann, N., Leite, CL. (2010). Enzyme screening of dikaryotic cultures from lignocellulolitic Basidiomycetes (fungi) collected in southern Brazil. ISULA Florian6polis, 37(7): 7-18.
Gao, R., Shi, T., Liu, X., Zhao, M., Cui, H., Yuan, L. (2016). Purification and characterisation of a salt stable protease from the halophilic archaeon Halogranum rubrum. Journal of the Science of Food and Agriculture, 97(5): 1412-1419.
Leck, A. (1999). Preparation of lactophenol cotton blue slide mounts. Community Eye Health, 12(30): 1-1.
Mueda, R T. (2015). Physico-chemical and color characteristics of salt-fermented fish sauce from anchovy Stolephorus commersonii. AACL Bioflux. 8(4): 565-752.
Nevalainen, H., Kautto, L., Te’o, J. (2014). Methods for isolation and cultivation of filamentous fungi. Environmental Microbiology: Methods and Protocols., 1096: 3-16.
Panta Gaurav, AnilPrakasha, J.V.P.Pavania (2015). Production, optimization and partial purification of protease from Bacillus subtilis. Journal of Taibah University for Science, 9(1): 50-55.
Ramakrishna, V., Rajasekhar, S., Reddy, L. S. (2010). Identification and purification of metalloprotease from dry grass pea (Lathyrus sativus L.) seeds. Applied Biochemistry and Biotechnology,
(1): 63-71.
Sandhya, C., Sumantha, A., Szakacs, G., Pandey, A. (2005). Comparative evaluation of neutral protease production by Aspergillus oryzae in submerged and solid-state fermentation. Process biochemistry, 40(8): 2689-2694.
Su, N.W., Wang, M.L., Kwok, K.F., Lee, M.H. (2005). Effects of temperature and sodium chloride concentration on the activities of proteases and amylases in soy sauce koji. Journal of agricultural and food chemistry, 53(5): 1521-1525.
Vermelho AB, Meirelles MNL, Lopes A, Petinate SDG, Chaia AA, Branquinha MH. (1996). Detection of extracellular proteases from microorganisms on agar plates. Mem Inst Oswaldo Cruz, 91(6): 755-760.
Vijayaraghavan, P., Vincent, SGP. (2013). A simple method for the detection of protease activity on agar plates using bromocresolgreen dye. Journal of Biochemical Technology, 4(3): 628-630.
Wang, D., Zheng, ZY., Feng, J., Zhan, XB., Zhang, LM., Wu, JR., Lin, CC. (2013). A high salt tolerant neutral protease from Aspergillus Oryzae: Purification, characterization and kinetic properties. Applied biochemistry and microbiology, 49(4): 378-385.
White T. J., Bruns T., Lee S., Taylor J., (1990). Amplification and direct sequencing of fungal ribosomal RNA genes for phylogenetics. PCR protocols: a guide to methods and applications. Academic press.18(1): 315-322.